Fungos patogênicos DNA - Sequenciamento


Sinonimo   PCR para aspergilose.
Material   soro congelado EXT
Volume   2,0 mL
Método   Técnica Sequenciamento Automático de DNA
Volume Lab.   2,0 mL
Rotina  
Código SUS  
CBHPM  
Resultado   45 dia(s)
Temperatura   Congelado
Coleta   Realizada em: - Soro (maior sensibilidade) - Lavado bronco-alveolar - Liquor Enviar ao menos 2mL de amostra, congelada.
Interpretação   A principal vantagem da detecção molecular no diagnóstico da aspergilose invasiva é que ao contrário de quase todos os outros métodos de detecção que não a cultura, há um elemento de amplificação do sinal de Aspergillus e, consequentemente, o método pode propiciar uma elevada sensibilidade. Indicações: diagnóstico de aspergilose invasiva. Interpretação clínica: Não Detectado. A sensibilidade é de 79 a 100% e a especificidade de 90 a 100% em aspergilose invasiva. Questiona-se se o tratamento prévio dimiui a sensibilidade do exame. Sugestão de leitura complementar: Barton RC. Laboratory Diagnosis of Invasive Aspergillosis: From Diagnosis to Prediction of Outcome. Scientifica 2013. Disponivel em http://dx.doi.org/10.1155/2013/459405. Consulta em 02 de 1bril de 2014. Mengoli C1, Cruciani M, Barnes RA, Loeffler J, Donnelly JP. Use of PCR for diagnosis of invasive aspergillosis: systematic review and meta-analysis. Lancet Infect Dis 2009;9(2):89-96.
Referência   Não Detectado Este exame tem uma sensibilidade de 99% e uma especificidade de 98%. TÉCNICA APLICADA: Extração de DNA a partir de lavado broncoalveolar, mediante utilização do kit MagNA Pure (Roche). Amplificação de uma sequência comum para a maioria dos fungos patogênicos, segundo Ferrer et al. (J. Clin. Microbiology 2011, p. 2873-2879). Detecção do produto amplificado através de eletroforese em gel de agarose corado com brometo de etídio. Sequenciamento bidirecional em sequenciador auto- mático ABI 3130XL (Applied Biosystems). Posterior amplificação de DNA de Pneumocystis jirovecii (carinii) com a utilização de primers específicos (J. Clin. Microbilogy Apr. 1998, p. 979-982) e detecção do produto amplificado (frag- mento de 418 pb) através de eletroforese em gel de agarose corado com brometo de etídio.